Przeciwciało superagonistyczne CD28 wywołuje 2 funkcjonalnie różne fale aktywacji komórek T u szczurów

Podawanie superjasystycznego przeciwciała CD28 JJ316 jest skutecznym sposobem leczenia chorób autoimmunologicznych u szczurów, ale humanizowane przeciwciało TGN1412 powodowało niszczące skutki uboczne u zdrowych ochotników podczas próby klinicznej. Tutaj pokazujemy, że leczenie JJ316 wywołało dramatyczną redystrybucję limfocytów T z obwodu do wtórnych narządów limfatycznych, powodując ciężką limfopenię T. Obrazowanie na żywo wtórnych narządów limfatycznych ujawniło, że podawanie JJ316 niemal natychmiast (<2 minuty) zatrzymało komórki T in situ. Zmniejszeniu ruchliwości komórek T towarzyszyły głębokie zmiany w układzie szkieletowym i zwiększona wielkość komórek. Dodatkowo, zwiększono ekspresję powierzchniową antygenu związanego z funkcjonowaniem limfocytu, różnicowanie śródbłonka białka fuzyjnego sfingolipidu G receptora i selektyny L było obniżone, a komórki straciły swoją reakcję na migrację skierowaną do fosfatazy skierowanej do sfingozyny. Te proadhezyjne zmiany towarzyszyły oznakami silnej aktywacji, w tym regulacją w górę CD25, CD69, CD134 i mediatorami prozapalnymi. Jednak nie doprowadziło to do burzy cytokinowej podobnej do próby klinicznej. Podczas gdy większość wczesnych zmian zniknęła w ciągu 48 godzin, zaobserwowaliśmy, że limfocyty T regulatorowe CD4 + CD25 + FoxP3 + doświadczyły drugiej fazy aktywacji, co spowodowało ogromne powiększenie komórek, rozległą polaryzację i zwiększoną ruchliwość. Dane te sugerują, że superligiści CD28 wywołują 2 jakościowo różne fale aktywacji. Wprowadzenie Skuteczna aktywacja naiwnych komórek T przez komórki prezentujące antygen wymaga jednoczesnego zaangażowania TCR i cząsteczki kostymulującej CD28 (1). Te 2 sygnały powodują podwyższenie poziomu receptorów na powierzchni komórki, takich jak CD25 (IL-2Ra), CD69, CD134 (Ox40) i związany z limfocytem A antygen-1 (LFA-1) (integryna aLp2), zmniejszone poziomy receptora 1-fosforanowego receptora sfingozyny (S1P) różnicowania śródbłonka sfingolipidu G receptora (EDG-1) i CD62L (selektyny L), synteza cytokin efektorowych i chemokin, dynamiczne przegrupowanie cytoszkieletu F-aktyny, i wreszcie, klonalną ekspansję aktywowanej populacji komórek T (2. 6). W przeciwieństwie do klasycznej kostymulacji, przeciwciała superintonistyczne CD28, takie jak JJ316 u szczurów i TGN1412 u ludzi, pozwalają na aktywację i ekspansję limfocytów T bez konieczności zaangażowania TCR (7). Wcześniejsze badania wskazały, że przeciwciała te preferencyjnie adresują CD4 + CD25 + FoxP3 + Tregs (8), subpopulację limfocytów, która powstaje w grasicy i można ją odróżnić od innych komórek T CD4 + za pomocą ich odmiennego wzorca ekspresji i zdolności do supresji proliferacji limfocytów (9) . Godne uwagi jest to, że ekspansja prawdziwych Treg przez superagonistyczne przeciwciała CD28 leży u podstaw korzystnego działania tych leków w leczeniu chorób autoimmunologicznych, takich jak EAE u szczurów (10, 11). Podczas gdy skuteczność w modelach zwierzęcych jest niewątpliwa, podawanie humanizowanego przeciwciała antygenowego CD28 TGN1412 zdrowym ochotnikom wywoływało druzgocące efekty uboczne (12). W ciągu kilku godzin pojedyncza dawka dożylna wywołała ciężką limfopenię i ogólnoustrojową reakcję zapalną prowadzącą do niewydolności wielonarządowej. Ostatnie dane sugerują, że masywne uwalnianie cytokin napotkane po podaniu TGN1412 może być specyficzną cechą ludzkich komórek odpornościowych (13). Jednak to, czy różnice w tych gatunkach dotyczą również innych niekorzystnych skutków TGN1412, pozostaje nieuchwytne. Pobudzeni przez pozorną rozbieżność pomiędzy korzystnymi efektami zaobserwowanymi u zwierząt i wynikami niedawnego badania klinicznego u ludzi, ponownie zbadaliśmy właściwości superjuntycznego przeciwciała CD28 JJ316 u szczurów. Nasze wyniki pokazują, że efekty JJ316 następują po dwufazowym kursie. Niemal natychmiast po infuzji iv limfocyty T są zatrzymywane w drugorzędowych narządach limfatycznych i tworzą klastry. Prowadzi to do dramatycznej redystrybucji od obwodu do śledziony i węzłów chłonnych, co powoduje ciężką limfopenię T podobną do badania klinicznego u ludzi. Uwięzione limfocyty T ulegają silnej aktywacji, jak wskazano w rearanżacjach cytoszkieletowych, zmienionej gęstości receptorów na powierzchni komórki i zwiększonej ekspresji mRNA prozapalnych cytokin i chemokin. Jednak w przeciwieństwie do scenariusza u ludzi poziomy cytokin w surowicy pozostają umiarkowane. Te natychmiastowe zmiany następują później po drugiej jakościowo innej fazie aktywacji, która głównie dotyczy prawdziwych Treg. Zatem przeciwciała superagonistyczne CD28 wywołują 2 różne fale aktywacji komórek T. Wyniki JJ316 powoduje głęboką limfopenię T przez indukcję redystrybucji limfocytów T do wtórnych narządów limfatycznych
[patrz też: fizjokursy, guz pancoasta, polfarmed ]