Odwrócenie utraty aksonów i niepełnosprawności w mysim modelu postępującej stwardnienia rozsianego ad

Członkowie rodziny Adamantane są dobrze znanymi antagonistami NMDA i wykazano, że blokują receptory NMDA zawierające podjednostki NR2A, NR2B lub NR2D (32). Oprócz rozpuszczalności w wodzie, włączenie biokompatybilnych i elastycznych mostków oligoetylenoglikolowych pomiędzy 2 ugrupowaniami funkcjonalnymi spowodowało polepszenie powinowactwa receptora NMDA, ponieważ fragmenty wiążące receptor nie są blokowane przestrzennie przez fragment fulerenu. Rycina 1: Leczenie ABSL-75 zmniejsza progresję choroby w postępującym postępującym EAE. (A) Fuleren ABS-75 składa się z rdzenia fulerenowego C60 (i) przyłączonego do 4 grup adamantylowych (ii) mostkami oligoetylenoglikolu (iii). (B) Przewlekłe postępujące EAE indukowano u 10-tygodniowych myszy NOD przez podskórną immunizację 150. G peptydu MOG35. 55 w 4 mg / ml CFA. Toksynę krztuścową podano iv (150 ng na mysz) w czasie immunizacji i 48 godzin później. Flereren ABS-75 (30 .g / kg, ip) podawano codziennie od 20 dnia. N = 10 zwierząt na grupę. Pojazd składał się z 2% DMSO. (C) Flerenol ABS-75 (30 .g / kg, ip) i memantynę (1,5 mg / kg) podawano codziennie od dnia 19. n = 9 ~ 10 zwierząt na grupę. Pojazd składał się z 2% DMSO. (D) Po lewej: EAE indukowano u 8-tygodniowych myszy SJL przez immunizację sc 50 .g peptydu PLP131 . 151 w 4 mg / ml CFA. Toksynę krztuścową podano iv (150 ng na mysz) w czasie immunizacji i 48 godzin później. Fulleren ABS-75 (30 .g / kg, ip) i memantynę (1,5 mg / kg) podawano codziennie od dnia 17. n = 15 zwierząt na grupę. Strzałki wskazują nawroty po pierwszym ataku. Dobrze: leczenie Fulerenem ABS-75 (30 .g / kg, ip) rozpoczęto dzień przed immunizacją MOG i wykonywano codziennie aż do końca przebiegu choroby nie było w stanie złagodzić ostrego EAE u myszy C57BL / 6J. n = 8 zwierząt na grupę. Wynik choroby mierzony w następujący sposób: 0, bez objawów choroby; 1, utrata tonu w ogonie; 2, niedowład tylny kończyny; 3, porażenie kończyny tylnej; 4, tetraplegia; 5, konając. ABS-75 jest pochodną fulerenów funkcjonalizowanych grupami karboksylowymi i wykazano, że fulereny funkcjonalizowane grupami karboksylowymi skutecznie przekraczają barierę krew-mózg (33). Ponadto, ABS-75 jest znacznie bardziej hydrofobowy niż większość fulerenów funkcjonalizowanych grupami karboksylowymi, i w przeciwieństwie do ujemnie naładowanych fulerenów funkcjonalizowanych grupami karboksylowymi, ABS-75 jest cząsteczką obojętną. Postawiliśmy hipotezę, że te cechy jeszcze bardziej zwiększą zdolność ABS-75 do przekroczenia bariery krew-mózg. Ponadto, nieszczelna bariera krew-mózg jest cechą EAE, co dodatkowo ułatwiłoby penetrację ABS-75 do mózgu. Wcześniejsze badania ukierunkowane na antyoksydanty koncentrowały się na dostarczaniu przeciwutleniaczy do mitochondriów (34, 35). Według naszej wiedzy, chociaż wiele związków funkcjonuje jako antagoniści receptora NMDA (36), nie opisano doniesień o działaniu przeciwutleniającego ugrupowania funkcjonalnego do receptora NMDA. Tutaj pokazujemy, że połączenie właściwości przeciwutleniających fulerenu z antydipotoksycznymi właściwościami antagonisty receptora NMDA w pojedynczej cząsteczce było skuteczne w blokowaniu uszkodzenia aksonów i zmniejszaniu postępu choroby w przewlekle postępującym modelu EAE. Wyniki Leczenie fulerenem ABS-75 zapoczątkowane po wystąpieniu choroby zmniejsza progresję EAE w przewlekle progresywnym modelu NOD EAE. W celu zbadania neuroprotekcyjnych efektów fulerenu ABS-75 (Figura 1A), indukowaliśmy przewlekłe postępujące EAE przez immunizację myszy NOD MOG35a55. Gdy 10-tygodniowe myszy NOD immunizowano MOG35 A 55 w CFA, pierwsze oznaki choroby pojawiły się w dniach 11-12 (osiągając szczyt w dniach 16. 18), i po częściowym wyleczeniu z tego początkowego ostrego ataku, wystąpił progresywnie pogarszający się nawrót bez pełnej remisji. Następnie przeprowadzono drugorzędny postępowy przebieg charakteryzujący się przewlekłym upośledzeniem klinicznym (ryc. 1B). Ten model został wybrany, ponieważ wydawał się być doskonałym modelem dla ostrego SM, a następnie postępującej fazy przewlekłej związanej z niepełnosprawnością neurologiczną. Flerenol ABS-75 (30 .g / kg, ip) podawano codziennie od dnia 20 (po zwierzętach odzyskanych od pierwszego szczytu choroby) do końca doświadczenia w dniu 70. Odkryliśmy, że leczenie ABS-75 rozpoczęto po początek choroby zmniejszył postęp EAE. Myszy leczone fluorescenem ABS-75a miały niższy średni wynik kliniczny w fazie środkowej (dni 31. 34) przebiegu choroby, a także pod koniec przebiegu choroby w porównaniu ze zwierzętami leczonymi podłożem (Figura 1B i Tabela 1) . Dwukierunkowa ANOVA ujawniła również, że silny wpływ leczenia na przebieg choroby. Tak więc progresja choroby była znacząco zmniejszona w grupie leczonej fulerenem w porównaniu z grupą leczoną podłożem (F = 271,68, P <0,0001). [hasła pokrewne: liczne pasma śluzu w moczu, hipokrates zabrze, elgal płock ]