Niezbędna rola cząsteczki rodziny TNF LIGHT jako cytokiny w patogenezie zapalenia wątroby czesc 4

Ponadto, biorąc pod uwagę, że ekspresja LIGHT o pełnej długości została wyrażona w tym eksperymencie, komórki NKT mogą nie być wymagane do rozszczepienia LIGHT związanego z błoną. Faktycznie, rozpuszczalny LIGHT wykryto na prawidłowych poziomach u myszy leczonych mAb anty-NK1.1p po hydrodynamicznej ekspresji LIGHT o pełnej długości (Suplementowa Figura 5). Ponadto egzogenna ekspresja LIGHT pośredniczy w pewnym poziomie zapalenia wątroby nawet przy braku ConA lub u myszy z niedoborem genu Rag (Suplementowa Figura 6), co sugeruje, że rozszczepianie i funkcje efektorowe rozpuszczalnego LIGHT nie wymagają ani innych bodźców zapalnych ani adaptacyjnych komórek odpornościowych. . Podsumowując, nasze odkrycia wskazują, że komórki NKT funkcjonują jako kluczowe komórkowe źródło światła LIGHT dla zapalenia wątroby, zamiast regulatora cięcia lub komórek efektorowych poniżej LIGHT. Rycina 4 Istotna rola komórek NKT w wytwarzaniu rozpuszczalnego LIGHT w zapaleniu wątroby wywołanym ConA. (A i B) myszy B6 traktowano ip 500 .g kontrolnej mysiej IgG lub mAb anty-NK1.1 (PK136) w dniach 0 i 3 (A). Podobnie, myszy B6 traktowano ip 30 .g kontrolnej króliczej IgG lub anty-asialo GM1 (ASGM1) w dniach 0 i 3 (B). W dniu 4 do każdej grupy wstrzyknięto dożylnie 30 mg / kg ConA, a surowice mysie zebrano godzinę później. Ilości rozpuszczalnego LIGHT mierzono za pomocą testu ELISA. * P = 0,02. (C) Myszom z niedoborem CD1d wstrzyknięto 20 .g wektora kontrolnego lub plazmidu kodującego LIGHT przez wstrzyknięcie hydrodynamiczne w połączeniu z subletalną dawką ConA (12,5 mg / kg). Surowice mysie zebrano 18 godzin później i zmierzono poziomy ALT. ** P = 0,002. Potencjał terapeutyczny szlaku LIGHT-LT aR w wywołanym przez Listeria monocytogenes. Zapaleniu wątroby. Na koniec oceniliśmy patogenną rolę i potencjał terapeutyczny LIGHT w ostrym modelu zapalenia wątroby indukowanym przez Listeria monocytogenes. Infekcja dootrzewnowa z wysoką dawką L. monocytogenes (2 x LD50 na mysz) powoduje ostre zapalenie wątroby związane z naciekiem komórek układu immunologicznego i martwicą hepatocytów, prowadzącą ostatecznie do śmierci w ciągu około 5 dni (33). Kiedy zakwestionowaliśmy myszy B6 typu dzikiego lub z niedoborem LIGHT z tą dawką L. monocytogenes, stwierdziliśmy, że przeżycie myszy z niedoborem LIGHT było znacznie dłuższe niż myszy kontrolnych (Figura 5A). Podobnie, selektywna blokada interakcji LIGHT-LT-R przez nasze mAb anty-LTR znacząco wydłużyła czas przeżycia u myszy zakażonych wysoką dawką monocytogenesy p w porównaniu z tymi leczonymi kontrolnym Ab (Figura 5B). Efekt ten nie był spowodowany zwiększonym usuwaniem bakterii, ponieważ miana L. monocytogenes w wątrobie i śledzionie były porównywalne między mAb anty-LTR. i kontrolę myszy leczonych Ab (dane nie pokazane). Ponadto wykryliśmy niską, ale znaczącą ilość rozpuszczalnego LIGHT w surowicy 24 godziny po zakażeniu (100. 70 ng / ml, n = 5). Analizy patologiczne ujawniły, że leczenie mAb anty-LTR zmniejszało infiltrację komórek zapalnych i martwicę hepatocytów, utrzymując w ten sposób ogólną integralność mikrostruktury wątroby (Figura 5C). Odkrycia te wskazują, że LIGHT odgrywa patologiczną rolę w zapaleniu wątroby wywołanym przez L. monocytogenes i że blokada szlaku LIGHT-LT . ma potencjał terapeutyczny w zapaleniu wątroby, w którym pośredniczą infekcje patogenów wątrobowych. Figura 5 Blokada interakcji LIGHT-LTRR w leczeniu zapalenia wątroby wywołanego przez L. monocytogenes. Myszy (A) B6 (puste kółka, n = 21) i myszy pozbawione LIGHT (wypełnione trójkąty, n = 21) wstrzyknięto dootrzewnowo L. monocytogenes (2 x LD50 na mysz) i monitorowano ich przeżycie. P = 0,007 między grupami. (B) Myszom B6 wstrzyknięto dożylnie 100 .g kontrolnej IgG (puste kółka, n = 10) lub mAb anty-LTR (wypełnione kółka, n = 11). W tym samym czasie myszy zainfekowano L. monocytogenes (2 x LD50 na mysz) przez wstrzyknięcie ip. Przeżywalność myszy monitorowano następnie. P = 0,03 między grupami. (C) Tak jak w B, myszy B6 infekowano L. monocytogenes i traktowano mAb anty-LT (3R lub kontrolną IgG. Trzy dni po infekcji przygotowano skrawki wątroby i wybarwiono H & E. Dyskusja W tym badaniu wytyczyliśmy nową funkcję LIGHT jako prozapalnej cytokiny do uszkodzenia hepatocytów. W trakcie eksperymentalnego zapalenia wątroby, aktywacja komórek odpornościowych, głównie komórek NKT, prowadzi do produkcji LEKKI, a następnie cięcia jako cytokiny. Rozpuszczalny LIGHT cyrkuluje układowo i pośredniczy w śmierci hepatocytów poprzez interakcję z LT. R. Selektywna blokada interakcji LIGHT-LT-R łagodzi eksperymentalne zapalenie wątroby wywołane przez ConA lub L. monocytogenes, co świadczy o istotnej, niebędącej w nadmiarze roli tego mechanizmu w promowaniu zapalenia wątroby. Chociaż sugerowano potencjalną rolę interakcji LIGHT z HVEM i LT. R w różnych chorobach zapalnych (11. 14), patogenne skutki i mechanizm leżący u podstaw tej roli nie zostały w pełni zbadane do tej pory
[podobne: zespół pancoasta, guz pancoasta, nemak bielsko ]