Niezbędna rola cząsteczki rodziny TNF LIGHT jako cytokiny w patogenezie zapalenia wątroby ad 6

Rzeczywiście, to pojęcie jest zgodne z wcześniejszymi doniesieniami, że pewne inhibitory MMP chronią myszy przed letalnym zapaleniem wątroby wywołanym przez endotoksynę (44) lub hepatotoksynę (45). W sytuacjach klinicznych ostatnie badania wykazały obecność rozpuszczalnego LIGHT w płukaniu oskrzelowo-pęcherzykowym pacjentów z twardziną z aktywnym stanem zapalnym, ale nie u osób bez aktywnego zapalenia (46). Znaleźliśmy również niskie, ale wykrywalne poziomy rozpuszczalnego LEKKA u około 30% pacjentów przewlekle zakażonych wirusem zapalenia wątroby typu B (K. Tamada i wsp., Dane niepublikowane). Podsumowując, odkrycia te sugerują, że rozpuszczalny LIGHT działa jako ważny akcelerator dla zapalenia tkanki, jak również potencjalny kliniczny marker aktywacji zapalnej. Istnieją znaczne dowody na to, że komórki NKT odgrywają nieodzowną rolę w patogenezie zapalenia wątroby wywołanego przez ConA (28, 29). Sugerowano również, że infekcja L. monocytogenes jest związana z aktywacją komórek NKT (47,48). Chociaż mechanizm uszkodzenia wątroby za pośrednictwem komórek NKT nie został w pełni zbadany, ich ekspresja FasL i IFN-a może powodować śmierć hepatocytów bezpośrednio lub pośrednio poprzez aktywację komórek Kupffera w celu wytworzenia TNF-a (49). Wykazano również, że osteoponty pochodzące z komórek NKT i ligand indukujący apoptozę indukowany przez TNF (TRAIL) są znaczącymi czynnikami przyczyniającymi się do zapalenia wątroby (50, 51). Nasze badania wykazały, że komórki NKT są niezbędne do produkcji, ale nie do cięcia ani funkcji efektorowych rozpuszczalnego LIGHT indukowanego przez iniekcję ConA. Co ciekawe, poziomy IFN-y w surowicy krwi i TNF-a, ale nie osteopontyna, w odpowiedzi na wstrzyknięcie ConA są znacząco zmniejszone u myszy z niedoborem LIGHT (Suplementalna Figura 7). Chociaż nie zbadaliśmy potencjalnego udziału tych efektów w zapaleniu wątroby z udziałem LIGHT, możliwe jest, że mediatory stanu zapalnego za LIGHT przyczyniają się do patogenezy bezpośrednio lub pośrednio poprzez efekty synergistyczne z LIGHT (24). Zapalenie wątroby i regeneracja wątroby wydają się być 2 stronami tej samej monety. Nadrodzina ligandu TNF, która pośredniczy w śmierci i zapaleniu wątroby, również przyspiesza regenerację wątroby, jak pokazano w TNF-a. i FasL (52, 53). Ostatnie badanie Andersa i in. wskazał, że interakcja LIGHT i LT. z LT. R również odgrywa kluczową rolę w stymulowaniu regeneracji wątroby (25). Ta podwójna funkcja LIGHT na hepatocytach mogłaby wyjaśnić pozornie sprzeczne ustalenia, że może ona chronić hepatocyty przed śmiercią (36) lub sama w sobie powodować apoptozę (24). Tak więc, LIGHT, jak również TNF-a i FasL ma integralne funkcje w regulacji homeostazy wątroby. Wydaje się, że czynniki te odgrywają niepoliczalne role, których nie mogą zrekompensować inni, ponieważ manipulacja jakimkolwiek z tych czynników znacząco zmienia homeostazę wątroby. Nasza praca w ten sposób identyfikuje krytyczną rolę dla rozpuszczalnego interakcji LIGHT-LT. R w patogenezie zapalenia wątroby. Selektywna regulacja tego ramienia pośród oddziaływań między LIGHT, LTR, HVEM i BTLA zwiększyłaby naszą zdolność do interweniowania w chorobach zapalnych bez wpływu na inne ważne funkcje związane z tymi szlakami molekularnymi. Metody Myszy, linie komórkowe i odczynniki. Myszy C57BL / 6J (B6) i BALB / c zakupiono odpowiednio z National Cancer Institute (Frederick, Maryland, USA) i Jackson Laboratory. Myszy z niedoborem CD1d lub LIGHT (tło B6) opisano wcześniej (7, 32). Dopasowane do wieku myszy w wieku od 5 do 8 tygodni były używane do wszystkich eksperymentów. Wszystkie eksperymenty na zwierzętach opisane w tym manuskrypcie zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Pielęgnacji i Użytkowania Zwierząt Johns Hopkins z Johns Hopkins University School of Medicine. Komórki A20 i 293T zakupiono od ATCC. Flagi LEGA, białka fuzyjne LT. R-Ig i HVEM-Ig zostały przygotowane zgodnie z wcześniejszym opisem (3, 5). Anty. Mysie mAb HVEM (klon, LH1) i anty-mysie LT. R mAb (klon, LLTB1) wytworzono w naszym laboratorium, jak opisano wcześniej (54). Hybrydoma PK136 zakupiono z ATCC, a mAb oczyszczono jak opisano wcześniej (54). Antyasialo GM1 zakupiono od Cedarlane Laboratories Ltd. Mysie IgG, szczurzy IgG i ludzkie IgG zakupiono od Sigma-Aldrich. Hamster IgG został zakupiony od Rockland Immunochemicals. Wszystkie plazmidy cDNA oczyszczono za pomocą zestawu do przygotowywania EndoFree Maxi (QIAGEN). Zapalenie wątroby wywołane przez ConA. Myszom wstrzyknięto iv albo letalną dawkę (25. 30 mg / kg) albo subletalną dawkę (12,5 mg / kg) ConA (Sigma-Aldrich) w PBS z lub bez hydrodynamicznej iniekcji plazmidowego DNA. Czas przeżycia myszy i poziom ALT w surowicy były okresowo monitorowane
[więcej w: bóle brzucha icd 10, liczne pasma śluzu w moczu, nemak bielsko ]